(哈藥集團生物疫苗有限公司，黑龍江哈爾濱，150030)

摘　要：豬傳染性胃腸炎由冠狀病毒引起，患病仔豬以嘔吐、腹瀉、脫水為特征。目前抗病毒和抗毒素等常規(guī)藥物對本病的治療作用不明顯，對這種病的預(yù)防和控制以接種疫苗為主，因此本文對豬傳染性胃腸炎疫苗的研究給以闡述，為有效地預(yù)防該疾病提供思路。并指出了研究中存在的問題以及未來展望為有效地預(yù)防該疾病提供思路。

關(guān)鍵詞：豬傳染性胃腸炎疫苗；應(yīng)用

Research and Application to Vaccine of Transmissible Gastroenteritis of pigs

（Harbin Pharmaceutical Group Bio-vaccine Co, Ltd，Harbin150030, China）

Abstract：Ansmissible Gastroenteritis of Pigs is caused by coronavirus. The symptom of Sicken piglets is vomiting, diarrhea and dehydration. Therapeutic effect of Antiviral and antitoxin is not obvious to ansmissible Gastroenteritis of Pigs.  Vaccination is  the main way of prevention and control to the ill. So this article gives an expound to the research of vaccine of ansmissible Gastroenteritis of Pigs, that can provide some ideas to prevent this ill. This article also points out the issues in the research and provide some ideas to prevent this ill effectively in the future.

Keywords：Transmissible gastroenteritis of pigs vaccine；Application

豬傳染性胃腸炎(Transmissible gastroenteritis of pigs，TGE)由冠狀病毒引起，患病仔豬以嘔吐、腹瀉、脫水為主要特征[1]。TGE在我國廣泛流行，冬春季節(jié)常發(fā)，是豬的常見多發(fā)病。豬傳染性胃腸炎具有發(fā)病突然、傳播迅速、流行面廣，它可使各年齡豬發(fā)病，而且仔豬場一旦發(fā)病其死亡率可達100%。TGE常與其他疾病并發(fā)或繼發(fā)，是引起規(guī)�；�養(yǎng)豬場仔豬腹瀉性死亡的主要原因之一。接種疫苗是預(yù)防和控制豬傳染性胃腸炎主要方法，目前抗生素和中西藥等常規(guī)藥物對本病的治療作用不明顯，主要是采用疫苗的預(yù)防。本文就目前臨床上應(yīng)用的以及正在研究的豬傳染性胃腸炎疫苗給以綜合論述。

1　豬傳染性胃腸炎疫苗的應(yīng)用

1.1 人工感染強毒

就是強毒感染免疫的辦法，主要用于妊娠母豬免疫使新生仔豬獲得被動保護，但由于病毒毒力過強，有使母豬流產(chǎn)和散毒的危險，目前國內(nèi)外已經(jīng)廢止此種方法。

1.2 滅活疫苗

哈爾濱獸醫(yī)研究所賈華強[2]用TB株培育的強毒制備TGE滅活細胞苗，制備疫苗用2種佐劑，即油包水乳化苗和氫氧化鋁吸附苗。通過現(xiàn)地實驗證明，TGE滅活細胞苗是安全的、反應(yīng)輕微的疫苗。在一些試驗中乳化苗的免疫原性明顯高于吸附苗。豬場用滅活細胞苗免疫母豬所產(chǎn)仔豬在離乳時的死亡率平均是8.5%低于美國、加拿大、荷蘭等國哺乳期仔豬死亡率。在產(chǎn)仔日檢測被免疫母豬初乳特異的病毒中和抗體水平實驗室評價免疫性的可靠方法。但其免疫應(yīng)答產(chǎn)生較慢，不能激發(fā)產(chǎn)生以SIgA抗體為主的黏膜免疫反應(yīng)，且制苗成本昂貴。

1. 3 弱毒疫苗　

    目前毒株主要有美國的TGE-Vac株、匈牙利的CKP株和日本的TO-163 株等。目前國產(chǎn)疫苗是由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所研發(fā)。應(yīng)用國內(nèi)分離的華毒株，采用二甲基亞礬處理細胞的方法，使病毒在胎豬腎細胞上培養(yǎng)并連續(xù)傳代165次致弱，其間又經(jīng)5次克隆純化篩選獲得。具有性能穩(wěn)定、免疫原性好及適用各種年齡、品種、性別豬只的特點。總保護率可達90%以上。該疫苗主要應(yīng)用于妊娠母豬，母豬在產(chǎn)前一個半月肌肉注射弱毒疫苗lmL，產(chǎn)前半個月再滴鼻(或后海穴位注射)1mL，可使新生仔豬在吮吸母乳后獲得免疫保護。該疫苗還可以用于主動免疫，新生仔豬口服0.5mL弱毒疫苗后7-14d后就可產(chǎn)生有效的免疫保護。但弱毒疫苗會出現(xiàn)免疫失敗，其主要原因是所產(chǎn)生的分泌性免疫球蛋白(SIgA)水平達不到自然感染TGEV時所產(chǎn)生的水平，并且可能出現(xiàn)毒力返強等不安全現(xiàn)象[3]。

1.4 聯(lián)苗

目前在豬病臨床上多采用聯(lián)苗進行豬傳染性胃腸炎等病毒性腹瀉病的預(yù)防。周仲芳等研制的PED和TGE弱毒二聯(lián)疫苗，免疫母豬所產(chǎn)仔豬通過哺乳獲得了相當(dāng)高的血清抗體，在出生后第7 d時接近母體的中和抗體水平抗體下降緩慢，在免疫后第5月，免疫豬血清中仍能檢測出抗體。在誘導(dǎo)妊娠母豬和小豬產(chǎn)生抗體以及母豬產(chǎn)后向哺乳仔豬傳遞抗體方面未見有相互影響的現(xiàn)象[4]。由于弱毒疫苗產(chǎn)生免疫力快，更適用于做緊急預(yù)防接種。但是目前，弱毒苗最令人關(guān)切的是穩(wěn)定性問題。終有恩等[5]用TGE及PED克隆化弱毒株以l:l配比制成TeE、PED二聯(lián)弱毒疫苗，經(jīng)克隆純化后都保持了良好的穩(wěn)定性。

    哈藥疫苗公司出品的豬傳染性胃腸炎(TGE)和豬流行性腹瀉(PED)二聯(lián)滅活苗，滅活疫苗在免疫后l4d產(chǎn)生免疫力，使用效果好，安全穩(wěn)定，毒力不返強；接種后能迅速的產(chǎn)生高水平而又持久的免疫保護力；可用于3日齡以上的仔豬免疫也可用于成豬及妊娠母豬接種；免疫途徑獨特，經(jīng)后海穴注射激發(fā)良好粘膜免疫；溶解迅速，易于操作，豬場實驗證明對不同年齡的豬只主動免疫保護率為96% ，妊娠母豬的被動免疫保護率為87%。

鄒勇等人[6]采用豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒和輪狀病毒細胞培養(yǎng)物制備了三聯(lián)滅活疫苗。實驗室免疫結(jié)果表明，育肥豬和妊娠母豬免疫后15d達到較高的免疫水平，免疫有效期超過6個月，母豬產(chǎn)前30d進行三聯(lián)苗免疫后，可使母豬分娩當(dāng)天的抗體維持在較高的水平，這就為新生豬提供了較高抗體水平的初奶。為初生豬被動免疫打下了基礎(chǔ)。分娩后30 d，母豬血清抗體仍然維持在較高的水平。

目前在防治豬傳染性胃腸炎上，使用復(fù)合疫苗非常普遍[7]。在美國已有多達具有12種抗原的復(fù)合疫苗得到注冊。PED和TGE為兩種均由冠狀病毒所致的腸道病毒病，在實際工作中很難確診，而且污染豬場混合感染的程度相當(dāng)高。復(fù)合疫苗的研制和使用為這兩種疾病的防制提供一種有效、方便的解決方法。

1.5 基因工程疫苗

轉(zhuǎn)基因植物疫苗是把植物基因工程技術(shù)與機體免疫機理相結(jié)合，生產(chǎn)出能使機體獲得特異抗病能力的疫苗。轉(zhuǎn)基因植物疫苗口服誘導(dǎo)粘膜免疫，生產(chǎn)簡便、成本低廉，不需要冷藏和低溫運輸?shù)�目前只能限于實驗室研究。核酸疫苗是基因疫苗研究的熱點，目前，研究較多的是DNA疫苗，它由編碼能引起保護性免疫反應(yīng)的病原體抗原基因片段和載體構(gòu)建而成。核酸疫苗克服了減毒活疫苗的可能返祖并導(dǎo)致人類和動物疾病，以及病毒發(fā)生變異而對新型的變異株不起作用的缺點，不過目前在臨床上由于其價格與多聯(lián)苗相比還不能被大面積應(yīng)用，尤其是針對豬傳染性胃腸炎這種冠狀病毒病。重組活載體疫苗重組活載體疫苗是用基因工程技術(shù)將病毒或細菌構(gòu)建成一個載體，把外源基因插入其中使之表達的活疫苗。重組活載體疫苗誘導(dǎo)產(chǎn)生的免疫比較廣泛，它具有活疫苗的免疫效力高、成本低及滅活疫苗的安全性好等優(yōu)點，目前處于研究階段。

結(jié)合目前現(xiàn)在臨床應(yīng)用仍使用豬傳染性胃腸炎和流行性腹瀉二聯(lián)苗多見，由此可見，我們的基因疫苗還需要大量的實驗與實踐，降低其成本更好地為養(yǎng)殖業(yè)服務(wù)。

2 疫苗的使用

     ⑴不同工藝的疫苗保存方法是不同的，疫苗的保存一定要嚴(yán)格的按照使用說明說上的方法進行保存，否者疫苗會失效。如豬流行性腹瀉與豬傳染性胃腸炎二聯(lián)油乳劑滅活疫苗需要在2℃-8℃保存，保存期一般為1年；豬傳染性胃腸炎弱毒疫苗需要-20℃條件下保存，保存期一般為3年 。   

⑵使用疫苗時要注意免疫接種的方法，如疫苗的接種方法不當(dāng)，有時會造成嚴(yán)重的后果。豬傳染性胃腸炎疫苗采用豬后海穴接種，效果較好。免疫動物的初乳及免疫仔豬血清中IL-2含量最高，在一定程度上反映了機體免疫功能的提高，說明后海穴對機體免疫機能有正向促進作用[8]。
       ⑶被免疫豬必須健康無病，發(fā)現(xiàn)發(fā)熱、發(fā)紺、食欲不振、呼吸困難、腹瀉、過度瘦弱和剛?cè)�勢的豬只不應(yīng)接種疫苗。正在潛伏期的豬只接種弱毒活疫苗后，可能會激發(fā)疫情，甚至引起豬只發(fā)病死亡。妊娠母豬盡可能不要接種弱毒活疫苗避免經(jīng)胎盤傳播，造成仔豬帶毒。

⑷避免使用免疫抑制劑，在免疫前后5~7天都要避免使用影響疫苗免疫應(yīng)答的藥物和免疫抑制劑，如氟苯尼考、磺胺類藥、氨基糖苷類等，因為對抗體的合成有一定抑制作用，或?qū)�T、B淋巴細胞轉(zhuǎn)化有明顯的抑制作用，從而影響免疫效果[9]。     
       ⑸接種疫苗后：豬只精神不振，減食，體溫稍高，臥地嗜睡等。一般不需治療，1～2天后可自行恢復(fù)；豬只表現(xiàn)呼吸加快、喘氣、眼結(jié)膜潮紅、發(fā)抖、口吐白沫、后肢不穩(wěn)、倒地抽搐等，可立即肌注0.1%鹽酸腎上腺等。

3 小結(jié) 

一般認(rèn)為，TGE的免疫為腸道免疫，即只有初乳中的IgA能在腸道中殺死病毒，抵抗感染。乳汁中高效價的IgG抗體也可能中和病毒，但由于母乳中IgG的效價下降很快，真正較長時間內(nèi)起作用的還是IgA。盡管TGE血清抗體的檢測并不能真正反映保護水平，但至少反映出機體通過感染或免疫產(chǎn)生了免疫反應(yīng)，血清中和抗體的水平從一定程度上反映出機體接受抗原刺激的劑量、方式或重復(fù)性。在開發(fā)TGEV疫苗時，如何捉高疫苗刺激母豬腸道IgA的應(yīng)答能力，同時又做到疫苗毒株已經(jīng)完全致弱或無感染力，以確保初生仔豬不發(fā)病。這是擺在疫苗研究人員面前的一大難題。大量研究結(jié)果表明，仔豬主要通過初乳獲得母源SIgA，產(chǎn)生對冠狀病毒性腹瀉的被動免疫保護，血清中的循環(huán)抗體IgG不能提供保護，經(jīng)非腸道免疫不能產(chǎn)生母源免疫[10]。因此，黏膜免疫是使仔豬獲得免疫保護的重要途徑。所以，探索安全、有效、廉價、可以誘導(dǎo)黏膜免疫的新型疫苗，是今后的研究方向。

參考文獻：

[1] 殷震, 劉景華. 動物病毒學(xué)(第2 版)[M]. 北京:科學(xué)出版社, 1997: 681-690.

[2] 賈華強. 豬傳染性胃腸炎滅活細胞疫苗[J]. 畜牧獸醫(yī)科技信息, 2007, 12: 128.

[3] 朱曉東. 豬傳染性胃腸炎疫苗應(yīng)用效果觀察[J]. 中國獸醫(yī)雜志, 2001, 37(7): 60.

[4] 周仲芳, 李樹根, 李力復(fù), 等. 豬流行性腹瀉和傳染性胃腸炎弱毒二聯(lián)疫苗免疫抗體應(yīng)答的研究[J]. 中國獸醫(yī)科技, 2002, 32(2): 3-5.

[5] 終有恩, 馮力, 李偉杰, 等. 豬傳染性胃腸炎與豬流行性腹瀉二聯(lián)弱毒疫苗的研究[J]. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報, 1999, 21(6): 406-408.

[6] 鄒勇, 許寶華, 錢永清, 等. 豬流行性腹瀉、豬傳染性胃腸炎和豬輪狀病毒三聯(lián)苗免疫試驗[J]. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報, 2005, 27(10): 107-109.

[7] Backstrom L . Present uses and experiences with swinevaccine [J]. Advances in Veterinary Medicine, 1999, 41: 419-428.

[8] 黃慶洲, 胥清富, 鄧義桂, 等. 豬后海穴接種豬傳染性胃腸炎疫苗對母乳及仔豬血清中IL-2含量的影響[J]. 中國獸醫(yī)學(xué)報, 2001, 21(5): 441-442。

[9] 呂惠. 序豬疫苗免疫接種應(yīng)注意哪些細節(jié)[J]. 養(yǎng)豬, 2010(5): 73-74。

[10] 陸承平. 獸醫(yī)微生物學(xué)(第3版) [M]. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社, 2001: 549-550.